Nátrium-citrát-puffert használunk az RNS izolálásához, mivel minimalizálja az RNS-szálak bázisos hidrolízisét. Ez fontos lépés a mRNS tisztításban a genomikai kutatás vagy a transzkripció tanulmányozása során.
A citrát-alapú pufferek segíthetnek az antigének rögzített szövetpreparátumokban történő kimutatásában is, mivel megtörik az antigének és a rögzítő közeg között kialakult keresztkötéseket.
Az alábbi útmutatóval készítsünk pH 6-os nátrium-citrát puffert. Az utasítások nemcsak egyszerűek, hanem gyorsak is. A lépések végrehajtásához csak körülbelül 10 percet vesz igénybe.
Két opció a puffer készítéséhez
Kétféle mód van a nátrium-citrát puffer előállítására. Először határozza meg, hogy van-e citromsav és a konjugátum alap, nátrium-citrát. Ha csak citromsav van, ez nem jelent problémát. Még mindig elkészítheti a puffert.
Másrészről, ha mind a sav, mind a bázis, hozzon létre egy törzsoldatot. Keverjünk össze 21 g citromsavat 1 liter desztillált vízben és 29,4 g nátrium-citrátot 1 liter desztillált vízben.
Ha csak citromsav van, keverje össze 2,1 g-ot mindössze 1 liter desztillált vízzel, és folytassa a következő lépéssel.
Citromsav és nátrium-citrát oldatok keverése
Most, hogy létrehoztad a készletedet (ha mind a sav, mind a bázis), vagy savas keveredt desztillált vízben (ha nem), akkor a megoldásokra összpontosíthatsz.
Keverjünk össze 82 ml citromsavoldatot 18 ml nátrium-citrát-oldattal.
Ezután a keverék teljes térfogatát csak 1 literre kell desztillált vízzel felmelegíteni. Hagyjon elegendő mennyiséget nátrium-hidroxid (NaOH) hozzáadásához a következő lépésben.
A pH beállítása
Az oldatot mágneses keverővel alaposan kevertetve 1 M nátrium-hidroxid-oldatot használva az elegy pH-ját 6,0-ra állítjuk be. Ezt követően az oldat végső térfogatát 1 literre desztillált vízzel egy térfogatmérő lombik segítségével készítsük el.
Mit kell tenni a puffert?
Nemcsak hogy nem tart sokáig a nátrium-citrát puffer előállításához, de ehhez sem sok anyag szükséges. Citromsavval, 1M nátrium-hidroxiddal, desztillált vízzel és kalibrált pH-mérővel, akkor félúton leszel. A nátrium-citrát használata opcionális.
A puffer elkészítéséhez egy 1 literes mérőhenger, egy literes mérőlombik és három 1 literes médium palack szükséges. Végül szüksége lesz egy mágneses keverőpultra és egy mágneses keverőre.
Ha nem rendelkezel mindezen anyagokkal, vegye fontolóra a laboratóriumot az iskolában vagy a munkahelyén, így nem kell saját maga megvásárolnia. Ön is könnyen vásárolhatja ezeket az anyagokat az interneten, vagy látogasson el az Ön területén lévő különleges áruraktárakba.