RFLP analízisnek is nevezik, a technika kihasználja az egyes emberek genetikai kódjainak polimorfizmusait . Annak ellenére, hogy egy faj minden tagjának lényegében ugyanaz a genetikai összetétele van, ezek a kisebb eltérések a fenotípus, például a megjelenés vagy az anyagcsere változatosságát jelentik az egyének között.
RFLP: Elemzési technika és alkalmazások
Az RFLP analízis technika magában foglalja az ismert variábilitású DNS- régiót, restrikciós enzimekkel, majd a DNS-fragmensek agaróz gélelektroforézissel való elválasztásával és a fragmensek és a relatív méretek számának meghatározásával.
A restrikciós enzim egy olyan enzim, egy fehérjemolekula, amely restrikciós helyeken csökkenti a DNS-t. Lényegében a DNS-mintát megtörik és a restrikciós enzimekkel emésztjük. A kapott fragmensek hosszaik szerint vannak elválasztva, és a fragmentumméretek mintája különböző lesz minden vizsgált személy esetében.
A teljes RFLP folyamat megkívánja a tapintócímkézést, a DNS fragmentációt, az elektroforézist, a blotot, a hibridizációt, a mosást és az autoradiográfiát. Az észlelt RFLP-t autoradiográfiával röntgenfilm alkalmazásával vizualizáljuk, ahol a DNS-fragmenseket elektroforézissel elválasztva és elemezve elemezhetjük és elemezhetjük.
Az RFLP-elemzések közül néhány az alábbiakat tartalmazza:
- DNS-ujjlenyomat . A törvényszéki tudósok RFLP-elemzést használhatnak a gyanúsítottak azonosítására, akik a bűncselekmények színhelyein összegyűjtött bizonyítékokon alapulnak.
- Apaság. Az RFLP-t az apaság meghatározására vagy az ősi származás követésére is használják.
- Genetikai sokféleség. A technika felhasználható a vadon élő állatok evolúciójának és migrációjának tanulmányozására, a tenyésztési minták tanulmányozására az állati populációkban, valamint bizonyos betegségek felderítésében és diagnózisában.
A genom variációjának RFLP-kimutatásának technikája a genom-feltérképezés és genetikai betegségek elemzésének alapvető eszköze. Ha egy bizonyos kóros kórokozó egy adott kóros gén helyét keresi, akkor a kutatók elemeznék egy család tagjainak DNS-ét a betegséggel, majd keresnének hasonló öröklési mintákat az RFLP allélekben.
Miután a betegség génje lokalizálódott, az RFLP-elemzés más családtagok számára lehetővé tenné a mutáns gének egyik hordozóját vagy a betegség általános kockázatát. Fontos megjegyezni, hogy az RFLP technikát nem széles körben használják most, hogy újabb és erőteljesebb technikákat használnak a DNS-elemzéshez a törvényszéki tudományban és számos más területen.
Az elemzés negatív aspektusa
Sajnos az RFLP elemzési technika fárasztó és lassú. Eltekintve attól, hogy nagy mennyiségű minta DNS-t igényel - a minta általában körülbelül egy negyednyi nagyságúnak kell lennie, ami viszonylag nagy a DNS-minták esetében - az eljárás a szonda címkéitől a mosásig és az autoradiográfiáig egy teljes hónapig.
Az emberi genetikai projekt eredményei nagyrészt felváltották az RFLP szükségességét. A projekt lehetővé tette az emberi sejtekben, az emberi genomban található DNS teljes szekvenciájának meghatározását és az összes gén azonosítását az emberi genomban.